薄層色譜法操作方法是主管藥師考試所要掌握的知識點之一,醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)搜集整理如下:
1.吸附劑和展開劑的選擇
?。?) 吸附劑:常用有硅膠、氧化鋁、聚酰胺、硅藻土等。硅膠、氧化鋁的活性與含水量有關(guān),含水量高,活性低,吸附力弱;聚酰胺表面的酰胺基可形成氫鍵,選擇性高。
?。?) 展開劑:極性較強的展開劑適用于極性較強組分的洗脫;極性較弱的展開劑適用于極性較弱組分的洗脫。加入少量酸、堿可以使極性物質(zhì)斑點集中,減少拖尾,提高分離度。
選擇一般原則是,分離極性較強組分時選用活性低的薄層板,以極性強的展開劑展開。分離弱極性組分時,宜選用活性高的薄層板,以極性弱的展開劑展開。調(diào)整待測組分Rf0.3~0.5范圍內(nèi)。
2.薄層板制備:1份固定相與3份水混和涂布,110℃烘30分鐘。
3.點樣與展開:點樣一般為直徑2~4mm圓點,距底2.0cm;展開距離一般為10~15cm.
4.斑點定位:有色可直接觀察;有熒光在紫外燈下觀察;噴灑顯色劑使組分顯色。