1.采集標本 淺部真菌的標本有毛發(fā)、皮屑、甲屑、痂等,標本在分離前常先用75%的乙醇消毒。深部真菌的標本可根據(jù)情況取痰、尿液、糞便、膿液、口腔或陰道分泌物、血液、腦脊液、各種穿刺液和活檢組織,采集標本時應(yīng)注意無菌操作。
2.檢查方法 真菌檢查的方法主要有:吉林市人民醫(yī)院皮膚科馮志宏
(1)直接涂片:為最簡單而重要的診斷方法。取標本置玻片上,加一滴10%KOH溶液,蓋上蓋玻片,在酒精燈火焰上稍加熱,待標本溶解,輕輕加壓蓋玻片使標本透明即可鏡檢??捎糜跈z查有無菌絲或孢子,但不能確定菌種。
(2)墨汁涂片:用于檢查隱球菌及其他有莢膜的孢子。醫(yī)學(xué)教育|網(wǎng)搜集整理方法是取一小滴墨汁與標本(如腦脊液)混合,蓋上蓋玻片后直接鏡檢。
(3)涂片或組織切片染色:涂片染色可更好地顯示真菌形態(tài)和結(jié)構(gòu)。革蘭染色適用于白念珠菌、孢子絲菌等;瑞氏染色適用于組織胞漿菌;組織切片通常用PAS染色,多數(shù)真菌可被染成紅色。
(4)培養(yǎng)檢查:可提高真菌檢出率,并能確定菌種。標本接種于葡萄糖蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基(Sabouraud agar)上,置室溫或37℃培養(yǎng)1~3周,必要時可行玻片小培養(yǎng)協(xié)助鑒定。菌種鑒定常根據(jù)菌落的形態(tài)及顯微鏡下形態(tài)判斷,對某些真菌,有時尚需配合其他鑒別培養(yǎng)基、生化反應(yīng)、分子生物學(xué)方法確定。