1.自身抗體滴度與疾病的相關性有些自身抗體是高特異性指標。如抗Sm抗體對SLE、抗可溶性肝抗原/肝胰抗原抗體對AIH等,一旦出現陽性(即使是低滴度),基本上就可做出診斷。但如果這些指標為陰性,也不能排除相關疾病的存在。相反有些指標雖然在疾病中的陽性率比較高,但特異性差,在很多疾病甚至健康人群中均可出現陽性(如ANA),這種抗體只有在高滴度時,才對相關疾病有診斷意義。自身抗體的滴度不僅對疾病診斷非常重要,并且有些抗體的滴度(如抗dsDNA抗體)與疾病的活動度密切相關,可用于療效和病程監(jiān)控。
2.關于抗核抗體(ANA)的滴度范圍檢測ANA的標準方法為間接免疫熒光(IIF)法,最好用Hep-2細胞和靈長類肝冰凍組織切片作為檢測基質。我科實驗室采用的是德國歐蒙公司Hep-2/猴肝檢測ANA間接免疫熒光試劑盒。其起始稀釋度為1:100,滴度超過1:320時,則提示自身免疫性疾病。由于不同檢測系統(tǒng)的起始稀釋度和滴度系統(tǒng)不同,檢測到的滴度數值不能直接進行比較。對ANA的結果不僅要關心其定性和滴度結果,同時還應了解所用檢測系統(tǒng)的實驗基質和起始稀釋度(正常參考范圍)。我科實驗室ANA(IIF)的臨界值(起始稀釋度)為1:100.在正常人群中ANA陽性率3-15%,抗體滴度較低,在年齡大于60歲的正常人群中ANA陽性率可高達10-37%.ANA滴度及臨床意義如下:ANA滴度熒光強度臨床意義<1:100-ANA陰性,血清標本中未檢出抗核抗體。
1:100(+)可疑陽性,繼續(xù)追蹤觀察。少數正常人群也可能陽性。
1:320+弱陽性,提示可能存在相關疾病。極少數正常人也可能陽性。
1:1000++中等陽性,提示可能存在相關疾病。
1:3200+++強陽性,高度提示存在相關疾病。
1:10000++++很強的陽性,高度提示存在相關疾病。
3.自身抗體檢測方法對結果的影響不同的檢測方法對實驗結果有一定影響,如抗dsDNA抗體檢測常用的方法有ELISA、放射免疫分析法和間接免疫熒光法(IIF)。這三種方法所能檢測的抗體的親和力差別很大,放射免疫法的特異性最高,IIF次之,ELISA較差。因此ELISA檢出抗dsDNA陽性時,應用其它方法確認。
4.自身抗體流行病學資料的積累在IIF檢測時,很多熒光模型相對應的靶抗原尚不清楚,且這些熒光模型的臨床意義不明確。隨著對自身免疫性疾病及其相關自身抗體研究的深入,越來越多的以前認為沒有臨床意義的抗體成為新的研究焦點。因而對于這些結果,實驗室也應該報告,以引起臨床的重視,通過臨床和實驗室的共同努力,不斷積累這些熒光模型的流行病學資料。
5.為何患者ANA陽性,卻無明顯臨床癥狀?
ANA陰性結果提示患者體內不存在抗核抗體。若患者僅僅出現ANA陽性結果而無其他臨床表現或指征,則并不提示自身免疫性疾病。主要原因如下:1)ANA在健康人群中的陽性率約為3-15%,而且ANA的產生與患者的年齡相關,年齡在65歲以上的健康人群ANA陽性率可高達10-37%.另外健康人群在感染病毒的情況下,也可能出現ANA陽性,但這些抗體多為短暫出現。
2)一些藥物治療可能引起ANA陽性。因此ANA陽性需結合患者用藥情況綜合判斷。
3)一些特殊疾?。ㄈ缒[瘤)也可能導致ANA陽性。
目前已有的研究表明,自身抗體往往早于臨床癥狀出現。對于SLE患者而言,至少有一種以上SLE相關自身抗體在臨床診斷前即已出現(最早達9.4年前,平均為3.3年),而且抗體與疾病特異性越高,出現的時間越晚。另外,隨著SLE病情進展,抗體產生的數量逐漸增加(見參考文獻[1])。
6.如何認識間接免疫熒光法ANA陰性,而印跡法靶抗原(SSA、Jo-1、M2、和dsDNA等)結果陽性的實驗結果?
客觀上不同的檢測方法學之間存在敏感度和特異性的差異。因此針對上述問題應根據靶抗原的實際結果,進行具體情況具體分析。
1)由于SSA和Jo-1抗原在真核細胞中的表達量不高,而且細胞固定劑對于抗原結構也可能產生影響,因此基于培養(yǎng)細胞作為基質的間接免疫熒光法絕非抗SSA和Jo-1抗體的最佳檢測方法。 2)抗線粒體M2抗體對PBC疾病的診斷具有良好的敏感性和特異性。有研究表明臨床明確診斷的PBC患者樣本,即使應用大鼠腎檢測抗線粒體M2抗體也可能出現熒光法陰性而重組抗原方法陽性的結果(見參考文獻[3])。
3)對于dsDNA抗體臨床檢測,由于不同實驗體系中所應用的抗原來源不同、抗原呈現形式不同以及反應條件不同等因素的影響,因此不同實驗方法學之間的結果并不具備可比性(見參考文獻[4])。
7.單獨出現Ro52抗體陽性是否具有臨床意義?
目前已有的研究表明,抗SSA抗體主要提示干燥綜合癥、SLE和新生兒紅斑狼瘡等疾病。但Ro52抗體在許多疾病中(如風濕性疾病、感染性疾病和自身免疫型肝病等)均有一定的發(fā)生率,因此單獨Ro52抗體陽性結果缺乏疾病,需結合其他檢測指標或臨床癥狀綜合判斷。例如自身免疫性肝炎患者出現SLA/LP抗體和Ro52抗體同時陽性,則提示患者病情較重、預后較差。醫(yī)學教育網|搜索整理
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