斑點免疫滲濾試驗的基本原理是:以硝酸纖維素膜為載體,利用微孔濾膜的可濾過性,使抗原抗體反應和洗滌在一特殊的滲濾裝置上以液體滲濾過膜的方式迅速完成。斑點免疫滲濾試驗最初是從斑點ELISA基礎上發(fā)展起來建立的,應用的結(jié)合物是酶標記的,稱為斑點酶免疫滲濾試驗。90年代初發(fā)展了以膠體金為標記物的斑點免疫滲濾試驗(dotymmunogoldfiltrationassay,DIGFA),又名滴金免疫測定法(簡稱滴金法)。在滴金法中不需酶對底物的反應,更加簡便、快速,在臨床檢驗中應用日漸廣泛醫(yī)學|教育網(wǎng)搜集整理。
原理
以雙抗體夾心法為例。在硝酸纖維素膜的膜片中央滴加純化的抗體,為膜所吸附。當?shù)渭釉谀ど系臉吮疽后w滲濾過膜時,標本中含抗原被膜上抗體捕獲,其余無關蛋白等沒濾出膜片。其后加入的膠體金標記也在滲濾中與已結(jié)合在膜上的抗原相結(jié)合。因膠體金本身呈紅色,陽性反應即在膜中央顯示紅色斑點。