病原檢查

1.直接鏡檢

取患者血液、骨髓或腦脊液、胸腹水、痰液、支氣管肺泡灌洗液、眼房水、羊水等作涂片，或淋巴結(jié)、肌肉、肝、胎盤等活組織切片，作瑞氏或姬氏染色鏡檢可找到滋養(yǎng)體或包囊，但陽性率不高。亦可作直接免疫熒光法檢查組織內(nèi)弓形蟲。

2.動(dòng)物接種或組織培養(yǎng)

取待檢體液或組織懸液，接種小白鼠腹腔內(nèi)，可產(chǎn)生感染并找到病原體，第一代接種陰性時(shí)，應(yīng)盲目傳代3次。或作組織（猴腎或豬腎細(xì)胞）培養(yǎng)以分離、鑒定弓形蟲。

3.DNA雜交技術(shù)

 國(guó)內(nèi)學(xué)者首次應(yīng)用32P標(biāo)記含弓形蟲特異DNA序列的探針，與患者外周血內(nèi)細(xì)胞或組織DNA進(jìn)行分子雜交，顯示特異性雜交條帶或斑點(diǎn)為陽性反應(yīng)。特異性和敏感性均高。此外，國(guó)內(nèi)亦已建立多聚酶鏈反應(yīng)診斷本病，并與探針雜交、動(dòng)物接種和免疫學(xué)檢查方法相比較，顯示春具高度特異、敏感和快速等優(yōu)點(diǎn)。

免疫學(xué)檢查

1.檢測(cè)抗體

所用抗原主要有速殖子可溶性抗原（胞質(zhì)抗原）和胞膜抗原。前者的抗體出現(xiàn)較早（用染色試驗(yàn)、間接免疫熒光試驗(yàn)檢測(cè)）、而后者的抗體出現(xiàn)較晚（用間接血凝試驗(yàn)等檢測(cè)）。同時(shí)采用多種方法檢測(cè)可起互補(bǔ)作用而提高檢出率。由于弓形蟲在人體細(xì)胞內(nèi)可長(zhǎng)期存在，故檢測(cè)抗體一般難以區(qū)別現(xiàn)癥感染或以往感染，可根據(jù)抗體滴度的高低以及其動(dòng)力學(xué)變化加以判斷。常用的檢測(cè)方法有：

（1）染色試驗(yàn)（Sabin-FeldmanDT）：檢測(cè)IgG抗體。感染后1～2周出現(xiàn)陽性，3～5周抗體效價(jià)達(dá)高峰，以后逐漸下降，可維持多年?？贵w效價(jià)1∶陽性提示為隱性感染；1∶256為活動(dòng)性感染1∶1024為急性感染。其缺點(diǎn)為需要活蟲進(jìn)行操作醫(yī)學(xué)|教育網(wǎng)搜集整理。

（2）間接熒光抗體試驗(yàn)（IFAT）：檢測(cè)IgM和IgG抗體。具靈敏、特異、快速、重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)，與DT基本一致。但如有類風(fēng)濕因子、抗核抗體陽性時(shí)，可引起假陽性反應(yīng)。血清抗體效價(jià)1∶64為既往感染，余同DT.

（3）間接血凝試驗(yàn)（IHA）：試驗(yàn)方法簡(jiǎn)便。與DT結(jié)果符合率高。但一般在病后一個(gè)月左右出現(xiàn)陽性。結(jié)果判斷同IFAT.重復(fù)性差和致敏紅細(xì)胞不穩(wěn)定與其缺點(diǎn)。

（4）酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）：可檢查IgM與IgG抗體。并有靈每度高、特異性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)。也可用于抗原鑒定。近年來在ELISA的基礎(chǔ)上又創(chuàng)建、衍生了多種新新的測(cè)定方法，如金葡萄A蛋白（SPA）-ELISA；辣根過氧化物酶標(biāo)記SPA取代酶標(biāo)第二抗體進(jìn)行ELISA檢測(cè)（PPA-ELISA）；親和素-生物素（ABG）ELISA；凝膠擴(kuò)散（DIG）-ELISA；斑點(diǎn)（DDT）-ELISA以及單克隆抗體（McAb）-ELISA等更靈敏、更特異的方法。

（5）放射免疫試驗(yàn)（RIA）：具有高度敏感性和特異性。

2.檢測(cè)抗原

系用免疫學(xué)方法檢測(cè)宿主細(xì)胞內(nèi)的病原（速殖子或包囊）、在血清及體液中的代謝或裂解產(chǎn)物（循環(huán)抗原）。是早期診斷和確診的可靠方法。國(guó)內(nèi)外學(xué)者建立了McAb-ELISA以及McAb與多抗的夾心型ELISA法檢測(cè)急性患者血清循環(huán)抗原，其敏感度為能檢出血清中0.4μg/ml的抗原。

皮內(nèi)試驗(yàn)

以受染小白鼠腹腔液或雞胚液作抗原。常出現(xiàn)延遲性、結(jié)核菌素反應(yīng)。可用作流行病學(xué)調(diào)查。目前應(yīng)用不多。