臨床酶學標準化的新途是生化檢驗考試復習需要了解的知識，醫(yī)學|教育網(wǎng)搜集整理了相關(guān)內(nèi)容與考生分享。

在臨床上，測定血清或其他組織中一些酶的水平對很多疾病的診斷、預防及判定病情的進展具有重要意義。酶的測定可利用生化學的方法測定酶的催化活性和將酶作為蛋白用免疫方法測定酶的質(zhì)量。測定酶的催化活性是最為常用方法，它具有迅速、靈敏、成本低等特點。是目前臨床上測定酶水平廣泛使用的常規(guī)方法。但這種方法也存在著不足，作者擬就臨床酶學測定中存在的問題及目前國際上解決問題的途徑結(jié)合我們的一些調(diào)查結(jié)果做一闡述。

一、 測定酶催化活性存在的問題

測定酶的催化活性雖然是臨床上最常用的方法，但由于酶的催化活性不僅決定于酶的含量，還受多種因素的影響，如所用底物的性質(zhì)及濃度、反應介質(zhì)的PH、溫度、離子強度、激活或抑制因子等，因此具有方法依賴性。這是測定酶的催化活性存在的主要問題所在。因此對同一酶項目存在多種參考范圍，各實驗室間的結(jié)果缺乏可比性，室間質(zhì)評用樣本的靶值難以確定，甚至有時會引起臨床上的誤診。國內(nèi)各臨床實驗室間測定，酶活性結(jié)果的差異較大，明顯高于一般項目的測定結(jié)果。

二、 解決酶活性測定方法依賴性的途徑

對酶活性測定進行標準化是解決這一問題的最好方法。早在20余年前國際上就開始了這方面的工作。當時提出的標準化途徑推薦使用統(tǒng)一的測定方法，一些學術(shù)團體推出了臨床常用酶催化活性測定的推薦方法和參考方法。如國際臨床化學聯(lián)合會（IFCC）酶專家組已經(jīng)完成了r-谷氨?；D(zhuǎn)移酶（GGT）（1983年）、堿性磷酸酶（ALP）（1983年）、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）（1986年）、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）（1986年）、肌酸激酶（CK）（1991年）、乳酸脫氫酶（LD）（1994年）及a-淀粉酶（a-AMS）（1998年）等的推薦方法。經(jīng)過多年的努力，成功地提高了酶測定的質(zhì)量和可比性。但效果仍不能令人滿意，還存在一些較嚴重的問題：第一，很多學術(shù)團體提出的推薦方法，即使原理相同，但試劑配方（緩沖液、底物、添加劑等）、反應溫度等也可能不同，因此不同推薦方法間缺乏一致性；第二，推薦方法無法跟上分析方法和分析技術(shù)上的進步；第三，它不適應自動化分析儀器。

最近國際上提出了酶活性的測定標準化新途徑，就是使用公認的酶校準物使不同的常規(guī)方法的測定結(jié)果得到統(tǒng)一。目前這項研究已取得了一定的進展。IFCC臨床酶學校準物工作組（IFCCWG-CCE）于1997年8月和1998年3月分別在瑞士和西班牙召開了工作組會議，作者作為工作組成員出席了會議并參與了有關(guān)文件的制定，部分內(nèi)容作為IFCC的文件將會很快發(fā)表。

三、 酶校準物的使用方法

使用酶校準物的方法就是用公認的酶校準物使一種或多種常規(guī)方法測定的結(jié)果與標準方法相同，也就是通過酶校準物將不同方法得出的結(jié)果的數(shù)值按標準物測定值所選定上午標準方法來表達。它是利用標準物作為載體，使測定結(jié)果的數(shù)值在標準方法和常規(guī)方法間傳遞。這樣的話，使用標準的校準物，就有可能統(tǒng)一測定結(jié)果。

法國的Ferard教授（IFCC WG-CCE主席）幾年前就組織了5個法國實驗室對各實驗室常規(guī)患者血清樣本中的a-AMS、ALP、GGT等3種酶活性分別在校準前后進行了測定。每種酶有兩個實驗室參加研究，均使用相同的試劑盒在自動生化分析儀上進行測定。各實驗室均使用統(tǒng)一的校準物即由歐洲標準局（BCR）提供的酶活性有證參考物（CRM318、CRM319、CRM371）進行校準。通過使用統(tǒng)一的酶校準物進行校準后，可使在不同溫度下（30℃、37℃）、使用不同緩沖液（ALP測定）、不同底物（a-AMS、GGT測定）或不同底物濃度（GGT測定）的試劑盒測定結(jié)果相對集中。