高效液相色譜法的應用是主管藥師考試輔導復習需要了解的知識，醫(yī)學|教育網搜集整理了相關內容與考生分享，希望給予大家?guī)椭?

高效液相色譜法（High Performance Liquid Chromatography \ HPLC）又稱“高壓液相色譜”、“高速液相色譜”、“高分離度液相色譜”、“近代柱色譜”等。高效液相色譜是色譜法的一個重要分支，以液體為流動相，采用高壓輸液系統(tǒng)，將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動相泵入裝有固定相的色譜柱，在柱內各成分被分離后，進入檢測器進行檢測，從而實現(xiàn)對試樣的分析。該方法已成為化學、醫(yī)學、工業(yè)、農學、商檢和法檢等學科領域中重要的分離分析技術。

高效液相色譜法

（一）速率理論

高效液相色譜法中影響柱效主要因素為渦流擴散項和傳質阻抗項。由于液體黏度比載氣大得多，而且柱溫多為室溫，其縱向擴散項很小，可忽略不計。范氏方程簡化為 H=A +Cμ 。

（二）高效液相色譜儀

1.高壓輸液泵

2.色譜柱：分析型和制備型

3.進樣閥

3.檢測器：①固定波長檢測器；②可變波長檢測器；③光二極管陣列檢測器

（三）應用

高效液相色譜法，只要求試樣能制成溶液，而不需要氣化，因此不受試樣揮發(fā)性的限制。對于高沸點、熱穩(wěn)定性差、相對分子量大（大于400以上）的有機物（這些物質幾乎占有機物總數(shù)的75%～80%）原則上都可應用高效液相色譜法來進行分離、分析。據(jù)統(tǒng)計，在已知化合物中，能用氣相色譜分析的約占20%，而能用液相色譜分析的約占70～80%。