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    微生物培養(yǎng)基手冊大全

    2012-09-06 17:36  來源:醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)    打印 | 收藏 |
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      1、營養(yǎng)瓊脂(普通瓊脂)

      成份:牛肉浸液(或其它浸液,消化液或肉膏湯) 100毫升瓊脂(視天氣,瓊脂質(zhì)量而定)

      制法:將上物加熱溶解,補足水,調(diào)ph至7.6,過濾分裝121℃,高壓滅菌15分鐘。

      用途:作普通瓊脂平皿。

      2、血瓊脂平板(BA)

      制法:取營養(yǎng)瓊脂(PH7.6),加熱使其溶解待冷至45-50℃,以滅菌操作于每100毫升營養(yǎng)瓊脂加滅菌脫纖維羊血或兔血5-10毫升,輕輕搖勻,立即傾注于平板或分裝試管,制成斜面?zhèn)溆谩?/p>

      用途:1. 一般棉拭子均接種此培養(yǎng)基。

      2.尿液,膿液

      3.分離細(xì)菌標(biāo)本用。

      3、基礎(chǔ)培養(yǎng)基 (肉膏湯BB)

      成份:蛋白胨 10克     牛肉膏 5克 氯化鈉 5克     水     1000毫升

      制法:將以上各物稱好,加水煮沸溶解,用1NNOH校正PH至7.6,過濾分瓶,121℃高壓滅菌,20分鐘備用。

      用途:1 作耐藥試驗,增菌用分裝小管。

      2 作普通瓊脂斜面。

      4、血液培養(yǎng)基(大管肉湯培養(yǎng)基)

      成份:1 新鮮牛肉浸液 1000毫升

      2 PABA(對氨基苯甲酸〔相當(dāng)于10mg/毫升〕) 1g% 1毫升

      3 MgSO4 [相當(dāng)于0.493/100毫升]    49.3% 1毫升

      4 枸椽酸鈉                      0.3g

      制法:1 將1號,4號混合液,2號,3號液分裝高壓滅菌。

      2 取滅菌1,4號混合液用無菌法加入PABA,MgSO4,再分管,行無菌試驗三天方可使用。

      用途:作血,骨髓培養(yǎng)用。

      5、腸道桿菌培養(yǎng)基(伊紅美蘭瓊脂)

      成份: 蛋白胨 10克       乳糖     10克    氯化鈉 5克       瓊脂     25(22)克     水    1000毫升     2%伊紅溶液20毫升     0.5%美蘭溶液 20毫升

      制法:將蛋白胨,氯化鈉瓊脂稱好,加水1000毫升使溶解,校正PH7.4過濾,補足失水,加入2%伊紅溶液20毫升,0.5%美蘭溶液20毫升,(115℃高壓20分鐘),冷卻至50℃左右傾注平板,凝固后存冰箱備用。(高壓以后方可再加乳糖)

      用途:用作分離沙門氏,志賀氏菌屬,也作菌群調(diào)查。

      6、羅文斯坦培養(yǎng)基

      成份:磷酸二氫鉀     2.4克       硫酸鎂 0.24克

      枸椽酸鈉    0.6克       天門冬素 3.6克

      純甘油(丙三醇) 12毫升       水     600毫升

      馬鈴薯粉    30克           雞蛋 1000毫升(約3公斤)

      2%孔雀綠水溶液 20毫升

      制法:1 除雞蛋外(還有孔雀綠)?蓪⑵渌锲贩Q好,放入大三角瓶包扎好,高壓滅菌。

      2 雞蛋用75%酒精泡30分鐘,滅菌法打蛋,倒入盛有玻璃珠的滅菌三角燒瓶內(nèi)充分將雞蛋搖散。

      3 將各成份按比例配好,分裝每管約5毫升。

      4 間歇滅菌第一次90℃1小時,第二次80℃半小時,第三次80℃半小時(或放85℃烤箱內(nèi)連續(xù)二次)。

      質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn): 1 滅菌試驗合格。

      2 接種結(jié)核桿菌要求兩星期生長良好。

      用途:作結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)用。

      7、結(jié)核半固體培養(yǎng)基

      成份:磷酸氫二鈉    19克           硫酸鎂     0.6克

      磷酸二氫鉀    2.5克       天門冬素 5克

      1%孔雀綠    1.5克           甘油    20毫升

      吐溫80(10%) 5毫升           水    1000毫升

      枸椽酸鈉       2.5克           動物血清 100毫升

      瓊脂           1.5克(80小時用甲醇去脂)

      1%孔雀綠    0.78毫升    吐溫80(10%) 5毫升

      加動物血清     100毫升

      制法: 1 除血清外將上述藥品均稱好,放入煮沸溶解,調(diào)PH7.2

      2 分管(每管約10毫升)包扎好,高壓,121℃半小時滅菌。

      3 待冷后無菌法加無菌血清(綿羊血或兔血)每管約1毫升備用。

      4 去除瓊脂方法:取瓊脂若干或于三角燒瓶中加甲醇于瓊脂1毫升用塞密封,放37℃溫浴80小時,每天搖動一次,冷卻后到時取出用濾紙過濾,待瓊脂自然冷卻后備用。

      質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn):1無菌實驗合格。

      2瓊脂硬度合適而清亮。

      3接種標(biāo)準(zhǔn)結(jié)核桿菌用,強度合適即可用。

      用途:培養(yǎng)結(jié)核桿菌用。

      8、亞碲酸鉀血瓊脂平板

      成份:瓊脂基礎(chǔ) 100毫升    1 0%葡萄糖     2毫升

      1%亞碲酸鉀 4.5毫升    綿羊血    10毫升

      制法:1將瓊脂基礎(chǔ)溶解好,加入羊血。

      2馬上加熱使成咖啡色后,稍冷再加入10%葡萄糖2毫升與1%亞碲酸4.5毫升混合后倒入無菌平板,凝固后存冰箱備用。

      質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn):接種白喉桿菌生長良好,其它革蘭氏陰性菌均抑制生長。

      用途:供培養(yǎng)及鑒別白喉桿菌用。

      9、米培養(yǎng)基

      成份:白米    20克           水     1000毫升

      瓊脂    20克       吐溫80 10毫升

      制法:1將20克米加水200毫升煮沸45分鐘,煮時將容器蓋好。

      2用紗布過濾,只要米湯,不要飯,加水至1000毫升。

      3加瓊脂20克,吐溫-80 10毫升煮溶,分裝中型管(每管約3毫升),包扎好,高壓,121℃半小時,消毒備用。

      質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn):1滅菌。

      2要求清亮。

      3接種白色念珠菌17-24小時生長良好,并產(chǎn)生厚膜孢子。

      用途:培養(yǎng)白色念珠菌用。

      10、蛋白胨水培養(yǎng)基

      成份:蛋白胨 1克    氯化鈉     0.5克

      水加至 100毫升     PH調(diào)至     7.8

      制法:把以上各物稱好溶于水,調(diào)節(jié)PH7.6分裝消毒備用。

      質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn):1 放置37℃無菌生長。

      2 接種大腸桿菌24小時生長良好。

      3 可作中國蘭平板基礎(chǔ)液。

      可作靛基質(zhì)基礎(chǔ)液(作此試驗需要色氨酸蛋白胨)。

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