在最新的《自然—方法學(xué)》（Nature Methods）雜志上，謝曉亮研究組再次發(fā)表文章，提出了利用其研究組自身研發(fā)的技術(shù)——受激拉曼散射（stimulated Raman scattering，SRS）顯微技術(shù)進(jìn)行RNA干擾實(shí)驗(yàn)的新方法。

　　這種新方法利用無需熒光標(biāo)記的受激拉曼散射顯微儀進(jìn)行定量成像，克服了生化分析方法繁瑣的色譜分析等問題，以及CARS顯微方法背景信號(hào)高，結(jié)果不精確等問題，是一種簡(jiǎn)單精確，適用于高通量分析的新技術(shù)。在這篇文章中，研究人員就利用這種方法篩選發(fā)現(xiàn)了8個(gè)在脂肪儲(chǔ)存調(diào)控方面的新調(diào)控因子。

　　肥胖是現(xiàn)代社會(huì)的一大病癥，會(huì)引起各種慢性疾病，比如II型糖尿病，心血管疾病等等。為了更好的了解肥胖，及其相關(guān)的代謝失序問題，我們需要深入分析脂肪在細(xì)胞水平和組織水平堆積的調(diào)控機(jī)制，目前已經(jīng)進(jìn)行了一些模式生物的脂肪儲(chǔ)存調(diào)控因子的全基因組分析，但是這些還遠(yuǎn)遠(yuǎn)不夠。

　　一般線蟲脂肪儲(chǔ)存調(diào)控因子分析方法主要包括傳統(tǒng)的生物化學(xué)分析方法，比如進(jìn)行線蟲的固定染色，熒光成像等，近期一些研究組報(bào)道了利用CARS顯微技術(shù)來分析。但是這兩種方法都存在一些局限性，生化分析方法需要從線蟲中提取脂肪，進(jìn)行繁瑣的色譜分析工作，這在基因組水平上是不可能完成，而且使用到的一些有機(jī)溶劑也會(huì)干擾實(shí)驗(yàn)分析。而利用CARS顯微技術(shù)進(jìn)行分析又存在背景信號(hào)高，靈敏度受限等問題。

　　這篇文章應(yīng)用的SRS顯微技術(shù)能通過對(duì)激光迅速反應(yīng)，精確調(diào)制來去除背景噪音，從而不僅能夠得到與傳統(tǒng)拉曼光譜一樣的譜圖，而且信號(hào)強(qiáng)度高了幾個(gè)數(shù)量級(jí)。利用這種方法和RNAi篩選相結(jié)合，研究人員就能在生理?xiàng)l件下尋找脂肪儲(chǔ)存調(diào)控基因了。經(jīng)過實(shí)驗(yàn)分析，研究人員從272個(gè)基因中找到了9個(gè)關(guān)鍵調(diào)控因子。

　　將SRS顯微技術(shù)與RNAi技術(shù)結(jié)合起來，能幫助研究人員在線蟲的活性生理?xiàng)l件下觀察脂肪代謝調(diào)控，而且這種方法無需標(biāo)記，極大的簡(jiǎn)化了樣品準(zhǔn)備過程，適用于模式生物的細(xì)胞追蹤，也有利于高通量篩選分析。

　　相關(guān)方法：受激拉曼散射顯微技術(shù)

　　完成人：謝曉亮課題組

　　實(shí)驗(yàn)室：美國(guó)貝勒醫(yī)學(xué)院分子與人類遺傳學(xué)系、赫芬頓老年研究中心 美國(guó)麻省總醫(yī)院分子生物學(xué)系 美國(guó)哈佛大學(xué)醫(yī)學(xué)院遺傳學(xué)系、化學(xué)與化學(xué)生物學(xué)系、物理系 美國(guó)哥倫比亞大學(xué)化學(xué)系