紅細(xì)胞檢查知識(shí)總結(jié)-檢驗(yàn)技師輔導(dǎo)精華:
1.概要
(1)紅細(xì)胞生理:
紅細(xì)胞生理:紅細(xì)胞是血液中數(shù)量最多的血細(xì)胞。我國(guó)成年男性紅細(xì)胞的數(shù)量為4.5×1012~5.5×1012/L,女性為3.5×1012~5.0×1012/L.紅細(xì)胞具有可塑變形性、懸浮穩(wěn)定性和滲透脆性。①可塑變形性指正常紅細(xì)胞在外力作用下發(fā)生變形的能力。紅細(xì)胞在全身血管中循環(huán)運(yùn)行時(shí),必須經(jīng)過變形才能通過口徑比自身小的毛細(xì)血管和血竇孔隙。②懸浮穩(wěn)定性指紅細(xì)胞能相對(duì)穩(wěn)定地懸浮于血漿中的特性。其評(píng)價(jià)指標(biāo)是紅細(xì)胞沉降率(血沉),即抗凝條件下以紅細(xì)胞在第一小時(shí)末下沉的距離表示紅細(xì)胞沉降的速率。正常成年男性第1小時(shí)末為0~15mm,女性為0~20mm.如果紅細(xì)胞的疊連加速,則血沉加快,說明紅細(xì)胞的懸浮穩(wěn)定性差。③滲透脆性指紅細(xì)胞在低滲鹽溶液中發(fā)生膨脹破裂的特性。紅細(xì)胞的滲透脆性越大,其對(duì)低滲鹽溶液的抵抗力越小,越容易發(fā)生破裂溶血。正常紅細(xì)胞在0.45%~0.40%NaCl溶液中開始出現(xiàn)部分溶血,在0.35%~0.30%NaCl溶液中完全溶血。醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)收集|整理剛成熟的紅細(xì)胞和巨幼紅細(xì)胞貧血的病人,紅細(xì)胞脆性小,衰老的紅細(xì)胞和某些病理情況下脆性大,容易破裂溶血。紅細(xì)胞在等滲的0.85%NaCl溶液中可保持其正常形態(tài)和大小。
紅細(xì)胞的主要功能是運(yùn)輸O2和CO2,紅細(xì)胞運(yùn)輸O2的功能是靠細(xì)胞內(nèi)的血紅蛋白來實(shí)現(xiàn)的。此外,紅細(xì)胞含有多種緩沖對(duì),對(duì)血液中的酸、堿物質(zhì)有一定的緩沖作用。我國(guó)成年男性血紅蛋白的含量為120~160g/L,女性為110~150/L.
蛋白質(zhì)和鐵是合成血紅蛋白的重要原料,而葉酸和維生素B12是紅細(xì)胞成熟所必需的物質(zhì)。在維生素B12的存在下,葉酸經(jīng)雙氫葉酸還原酶作用,形成四氫葉酸,參與紅細(xì)胞內(nèi)DNA合成。由腎臟產(chǎn)生的促紅細(xì)胞生成素(EPO)可加速幼紅細(xì)胞的增殖和血紅蛋白的合成,促進(jìn)網(wǎng)織紅細(xì)胞的成熟與釋放,對(duì)早期紅系祖細(xì)胞的增殖與分化有一定的促進(jìn)作用,EP0是機(jī)體紅細(xì)胞生成的主要調(diào)節(jié)物。另外雄激素可直接刺激骨髓造血,也可以促進(jìn)腎釋放促紅細(xì)胞生成素,因此男性紅細(xì)胞和血紅蛋白高于女性。
(2)血紅蛋白
血紅蛋白是人體血液中紅細(xì)胞內(nèi)的主要成分,它的主要生理功能是作為呼吸系統(tǒng)的載體,它具有易與氧和二氧化碳結(jié)合的特性,可將人體吸入的氧氣從肺部輸送到全身各組織醫(yī)`學(xué)教育網(wǎng)搜集整理,再將組織中的二氧化碳運(yùn)送到肺后呼出體外。血液的顏色是紅色的,這也與血紅蛋白有關(guān)。
血紅蛋白確是用于評(píng)價(jià)是否貧血的一個(gè)重要和常用指標(biāo),但不是唯一指標(biāo)。醫(yī)生常說的貧血和不貧血也多以血紅蛋白測(cè)定值為主要依據(jù)。這里需要解釋的是,血紅蛋白和紅細(xì)胞計(jì)數(shù)具有基本相同臨床應(yīng)用價(jià)值,血紅蛋白與紅細(xì)胞還有特定的比例關(guān)系,如每升血液中有1.00×1012個(gè)紅細(xì)胞,相當(dāng)于每升血液中血紅蛋白濃度為30克(30g/L)。可以通過這個(gè)比例關(guān)系分析血紅蛋白濃度和紅細(xì)胞數(shù)量是否平行。如有較大的差異則說明紅細(xì)胞的體積大小和形態(tài)有所改變,或紅細(xì)胞內(nèi)含的血紅蛋白的量有所改變,此時(shí)應(yīng)該注意MCV、MCH、MCHC等幾個(gè)紅細(xì)胞參數(shù),他們也是分析判斷貧血的幾個(gè)重要指標(biāo)。
血紅蛋白測(cè)定:
(一)檢測(cè)原理血液中血紅蛋白以各種形式存在,包括:氧合血紅蛋白、碳氧血紅蛋白、高鐵血紅蛋白(Hi)或其他衍生物。采用比色法測(cè)定,包括:氰化高鐵血紅蛋白(HiCN)測(cè)定法、十二烷基硫酸鈉血紅蛋白(SDS)測(cè)定法、疊氮高鐵血紅蛋白(HiN3)法、堿羥血紅蛋白法、溴代十六烷基三甲胺(CTAB)血紅蛋白測(cè)定法等。
2.紅細(xì)胞計(jì)數(shù)
【原理】用等滲稀釋將血液稀釋一定脫當(dāng)選后,滴入血細(xì)胞計(jì) 數(shù)盤,然后于顯微鏡下,計(jì)數(shù)一定范圍內(nèi)的紅細(xì)胞數(shù),經(jīng)過換算即可求得每升積壓液中紅細(xì)胞數(shù)。傳統(tǒng)的紅細(xì)胞稀釋是Hayem液,由氯化鈉、結(jié)晶硫酸鈉、氯化 高汞溶于蒸餾水制成,其中氯化鈉的作用是調(diào)節(jié)滲透壓,硫酸鈉可提高比密防止細(xì)胞粘邊,氧化高汞為防腐劑,本試劑的主要缺點(diǎn)是如遇高球蛋白血癥患者,由于球 蛋白沉淀使紅細(xì)胞容易凝結(jié)。近來,甲醇枸椽酸鹽稀釋液和到廣泛應(yīng)用,此液優(yōu)點(diǎn)在于配制簡(jiǎn)單,紅細(xì)胞不凝集,并在稀釋小時(shí)后仍然介質(zhì)正常的圓盤形,急診時(shí), 普通生理鹽水或加1%甲醛的生進(jìn)鹽水液均可體紅細(xì)胞稀釋使用醫(yī)`學(xué)教育網(wǎng)搜集整理。
【紅細(xì)胞計(jì)數(shù)(RBC)正常參考值】:
男:4.0×1012~5.5×1012/L
女:3.5×1012~5.0×1012/L
新生兒:3.5×1012~5.0×1012/L
紅細(xì)胞數(shù)與血紅蛋白濃度之間一般是平行的醫(yī)學(xué)教|育網(wǎng)搜集整理。
生理性增加:見于新生兒、高山高原居住者。
病理性增加:真紅細(xì)胞增多癥、先天性心臟病、慢性乏氧性疾病如肺心病等、脫水等。
減少見于:各種貧血、白血病、產(chǎn)后、手術(shù)后失血等。某些疾病可引起紅、白細(xì)胞及血小板均減少,如再生障礙性貧血等。
【臨床意義】
1.生理變化
(1)年齡與性別的差異:初生兒由于在母體內(nèi)以彌漫方式從母體血液獲得氧氣,通常處于生理性缺氧狀態(tài),故紅細(xì)胞明顯增高,但在出生2周后就逐漸下降。男性兒童在6-7歲時(shí)最低,隨著年齡增大而逐漸上升,到25-30歲時(shí)達(dá)高峰,30歲后隨年齡的逐漸下降,直到60歲時(shí)尚未停止。在女性兒童也隨年齡增大逐漸增長(zhǎng),到13-15歲時(shí)達(dá)最高值,而后帽于月經(jīng)、內(nèi)分泌等因素影響逐漸下降,到21-35歲維持最低水平后又逐漸升高與男性水平相近。
(2)精神因素:感情沖動(dòng)、興奮、恐懼、冷水浴刺激均可使腎上腺素增多,導(dǎo)致紅細(xì)胞暫時(shí)增多。
(3)劇烈的體力勞動(dòng):主要因勞動(dòng)時(shí)氧需要量增加所致的相對(duì)乏氧等引起,一般成有要安靜時(shí)每分鐘全身耗氧0.3-0.4L肌肉運(yùn)動(dòng)時(shí)可增加到2-2.5L,最高可達(dá)到來-4.5L此時(shí)由于紅細(xì)胞生成素生成增加而骨髓加速釋放紅細(xì)胞,導(dǎo)致紅細(xì)胞增多。
(4)當(dāng)氣壓低時(shí),因缺氧刺激,紅細(xì)胞可代償性增生。高山地區(qū)居民和登山運(yùn)動(dòng)員紅細(xì)胞數(shù)均高于正常,乃因大氣稀薄、氧分壓低,人體接受了缺氧的刺激后,血漿中紅細(xì)胞生成素水平升高,引起骨髓產(chǎn)生更多的紅細(xì)胞所致。
(5)妊娠中、后期,為適應(yīng)胎盤循環(huán)的需要,通過神經(jīng)、體液的調(diào)節(jié),孕婦的血漿容量明顯增加而引起血液稀釋;6個(gè)月—2歲的嬰幼兒由于生長(zhǎng)發(fā)育迅速所致的造血原料相對(duì)不足;某些老年人造血功能明顯減退等均可導(dǎo)致紅細(xì)胞減少,統(tǒng)稱為生理性貧血醫(yī)`學(xué)教育網(wǎng)搜集整理。
2.病理變化
(1)增多:常見者有三類:
①相對(duì)性增多:血漿中水分丟失,血液中有形成分也相對(duì)地有所增加,為一種暫時(shí)性假象,多見于脫水血濃縮時(shí)??梢蜻B續(xù)嘔吐、嚴(yán)重腹瀉、多汗、多尿、大面積燒傷或晚期消化道腫瘤患者,長(zhǎng)期不能進(jìn)食等原因而引起。
②絕對(duì)性增多:慢性肺心病、某種腫瘤及某些紫紺型先天性心臟病(如法樂四聯(lián)癥)影響氣體交換時(shí),紅細(xì)胞數(shù)明顯增高。
③真性紅細(xì)胞增多癥:系原央不明的造血系統(tǒng)增殖性疾病,由于本病多同時(shí)有中性粒細(xì)胞和血小板增多,故目前認(rèn)為由多能造血干細(xì)胞受累所致。
(2)減少:由于各種病因?qū)е轮車t細(xì)胞減少,即病理性貧血。
【操作方法】血細(xì)胞計(jì)數(shù)板(改良牛鮑計(jì)數(shù)板):用優(yōu)質(zhì)厚玻璃制成。每塊計(jì)數(shù)板由H形凹槽分為2個(gè)同樣的計(jì)數(shù)池。計(jì)數(shù)池兩側(cè)各有一條支持柱,將特制的專用蓋玻片覆蓋其上,形成高0.10mm的計(jì)數(shù)池。
3.血紅蛋白測(cè)定
(1)檢測(cè)原理
血紅蛋白測(cè)定原理是檢驗(yàn)主管技師考試的內(nèi)容,醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)搜集整理相關(guān)內(nèi)容供大家參考。
當(dāng)稀釋血液中加入溶血?jiǎng)┖螅t細(xì)胞溶解并釋放出血紅蛋白,血紅蛋白與溶血?jiǎng)┲械哪承┏煞纸Y(jié)合形成一種血紅蛋白衍生物,在特定波長(zhǎng)(530~550nm)下比色,吸光度變化與稀釋液中Hb含量成正比,最終顯示Hb濃度。不同類型血液分析儀,溶血?jiǎng)┡浞讲煌纬裳t蛋白衍生物不同,吸收光譜不同,如含氰化鉀的溶血?jiǎng)c血紅蛋白作用后形成氰化血紅蛋白,其最大吸收蜂接近540nm.
(2)方法學(xué)評(píng)價(jià)
1、氰化高鐵血紅蛋白法(HiCN):1966年被ICSH推薦為參考方法。該法操作簡(jiǎn)單、顯色快、結(jié)果穩(wěn)定可靠、讀取吸光度后可直接定值等優(yōu)點(diǎn)。其致命的弱點(diǎn)是氰化鉀(KCN)試劑有劇毒,使用管理不當(dāng)可造成公害。
2、十二烷基硫酸鈉血紅蛋白測(cè)定法(SDS):該法操作簡(jiǎn)單、呈色穩(wěn)定、準(zhǔn)確性和精確性符合要求、無公害等優(yōu)點(diǎn)。但由于摩爾消光系數(shù)尚未最后確認(rèn),不能直接用吸光度計(jì)算Hb濃度,而且SDS試劑本身質(zhì)量差異較大會(huì)影響檢測(cè)結(jié)果。
3、疊氮高鐵血紅蛋白(HiN3)法:該法優(yōu)點(diǎn)與HiCN測(cè)定法相似、最大吸收峰在542nm、顯色快、結(jié)果穩(wěn)定、試劑毒性僅為HiCN測(cè)定法的1/7,但仍存在公害問題。
4、堿羥血紅蛋白(AHD 575)測(cè)定法:該法試劑簡(jiǎn)單、呈色穩(wěn)定、無公害、吸收峰在575nm、醫(yī)學(xué)|教育|網(wǎng)搜集整理可用氯化血紅素作為標(biāo)準(zhǔn)品。但儀器多采用540nm左右濾光板,限制了此法使用。
5、溴代十六烷基三甲胺(CTAB)血紅蛋白測(cè)定法:該法試劑溶血性強(qiáng)又不破壞白細(xì)胞,適用于儀器上自動(dòng)檢測(cè)Hb和白細(xì)胞。缺點(diǎn)是測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確度和精密度不佳。
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