檢驗(yàn)師：《答疑周刊》2017年第23期

2017-04-01 14:01 來源：

打印

字體：大小

檢驗(yàn)師：《答疑周刊》2017年第23期：

1.【問題】雙向免疫擴(kuò)散沉淀現(xiàn)象分析?

【解答】雙向免疫擴(kuò)散是利用瓊脂凝膠為介質(zhì)的一種沉淀反應(yīng)，擴(kuò)散作用使分處兩處的抗原和相應(yīng)抗體相遇，形成抗原—抗體復(fù)合物，比例合適時(shí)將出現(xiàn)沉淀現(xiàn)象。

如果是相同抗原兩條沉淀線相同會(huì)吻合相連；

如果部分相同會(huì)部分相切；

如果完全不同，沉淀線也不相同，會(huì)交叉而過。

2.【問題】糖尿病酸中毒各指標(biāo)有什么變化？

【解答】糖尿病代謝性酸中毒時(shí)：HCO3-原發(fā)性下降，PCO2代償性下降，血氯代償性升高，血清鉀升高。血鈉升高，血鈣降低。

3.【問題】酶橋法免疫組化檢測(cè)和ABC法的區(qū)別？

【解答】酶橋法：抗酶抗體作為第三抗體，通過橋抗體（第二抗體），將特異性識(shí)別組織抗原的第一抗體與第三抗體連接起來，形成酶聯(lián)的抗原-抗體復(fù)合物，加底物顯色。

酶橋法較酶標(biāo)法的敏感性有所提高，但操作分四步，較為復(fù)雜。在酶橋法中，如果抗酶抗體與酶結(jié)合弱，在操作中酶常被沖洗掉；如果酶標(biāo)記在非特異性抗體上就會(huì)存在背景著色問題；如果抗酶抗體的非特異性成分與橋抗體結(jié)合，就會(huì)與抗酶抗體競爭橋抗體結(jié)合位點(diǎn)，影響方法的敏感性。

親和素-生物素-過氧化物酶復(fù)合物技術(shù)（ABC）法的反應(yīng)原理是：按一定比例將親和素與酶標(biāo)生物素結(jié)合，形成可溶性親和素-生物素-過氧化物酶復(fù)合物（ABC）。當(dāng)其與檢測(cè)反應(yīng)體系中的生物素化抗體（直接法）或生物素化第二抗體（間接法）相遇時(shí)，ABC中未飽和的親和素結(jié)合部位即可與抗體上的生物素結(jié)合，使抗原抗體反應(yīng)體系與ABC標(biāo)記體系連成一體進(jìn)行檢測(cè)。

ABC法的優(yōu)點(diǎn)：敏感性高。生物素與親和素的結(jié)合十分牢固，并且1個(gè)分子親和素有4個(gè)生物素結(jié)合位點(diǎn)，可以分別和生物素化的抗體和酶結(jié)合，l個(gè)過氧化物酶或免疫球蛋白分子又可結(jié)合多個(gè)生物素分子，從而形成網(wǎng)絡(luò)狀復(fù)合物。醫(yī)學(xué)/教育網(wǎng)搜集整理此外，ABC法尚具有親和力強(qiáng)、特異性高、第一抗體和第二抗體工作濃度低、操作時(shí)間短、可以多重標(biāo)記等特點(diǎn)。

4.【問題】與可溶性抗原結(jié)合的顆粒性載體有什么要求？

【解答】顆粒型載體應(yīng)具有化學(xué)惰性，不得與樣品組分起化學(xué)反應(yīng)，且穩(wěn)定性要好等。