醫(yī)學(xué)教育|網(wǎng)小編整理了“Rh血型鑒定的操作方法”相關(guān)知識(shí)供大家參考學(xué)習(xí)，希望對(duì)大家能夠有所幫助！

（包括菠蘿酶、木瓜酶、無花果酶、胰蛋白酶等） 以菠蘿酶介質(zhì)法為例：

（1）蛋白水解酶法

⑴取菠蘿酶1g，加pH5.5磷酸鹽緩沖液100ml，充分振搖混勻，置37℃水浴箱30min，離心沉淀后取上清液即1%菠蘿酶液。放置4℃冰箱貯存。

⑵待檢者紅細(xì)胞及對(duì)照紅細(xì)胞用生理鹽水洗滌1次（有溶血的紅細(xì)胞除外），配成5%紅細(xì)胞懸液。

⑶取小試管15支，分3排，每排試管按C、c、D、E、e順序標(biāo)記。

⑷每排第1管加抗C血清，第2管加抗c血清，第3管加抗D血清，第4管加抗E血清，第5管加抗e血清各1滴。

⑸第1排各管加待檢者紅細(xì)胞懸液各1滴，第2排加陽性對(duì)照紅細(xì)胞，第3排加陰性對(duì)照紅細(xì)胞。

⑹每排各管加1%菠蘿酶液1滴。

⑺混勻，置入37℃水浴箱中1h觀察結(jié)果，若無凝集，應(yīng)查找原因。

結(jié)果判讀：

⑴傾斜試管肉眼觀察，先看陽性對(duì)照管應(yīng)凝集，陰性對(duì)照管不凝集，再看待檢者的試管有凝集者為陽性，無凝集者為陰性。如肉眼觀察有疑問者再做鏡檢。

⑵分別記錄，陽性或陰性。

⑶抗RhD陰性者，應(yīng)作間接抗人球蛋白試驗(yàn)，以免遺漏Du型。附注：凡檢查出體內(nèi)有Rh抗體者，應(yīng)發(fā)給Rh血型卡。需要時(shí)，一方面動(dòng)員捐出血液，另—方面須提高警惕，以免接受不相合的血液而發(fā)生意外。

（2）鹽水介質(zhì)法

⑴試管法

①取小試管3支，1支注明抗D，另1支注明陽性對(duì)照，最后1支注明陰性對(duì)照；

②將室溫鹽水反應(yīng)活性的抗D血清各1滴加入上述試管內(nèi)；

③抗D試管中加入1滴5%待檢者紅細(xì)胞（鹽水、血清）懸液，陽性對(duì)照及陰性對(duì)照試管中分別加入相應(yīng)的陽性紅細(xì)胞及陰性紅細(xì)胞懸液1滴；④輕輕混勻，于3000r/min離心15s；⑤取出輕輕擺動(dòng)觀察有無凝集。

結(jié)果判讀：抗D試管中出現(xiàn)凝集，而陰性對(duì)照試管不凝集，陽性對(duì)照試管凝集，待檢者為陽性；抗D管和陰性對(duì)照管均不凝集，陽性對(duì)照試管凝集，待檢者為陰性。

⑵平板法

①取潔凈平板1塊，用記號(hào)筆劃出反應(yīng)小格，在左側(cè)注明抗D，中間段注明陰性對(duì)照，右側(cè)注明陽性對(duì)照；

②將室溫鹽水反應(yīng)的抗D血清各1滴加入上述小格內(nèi)；

③抗D小格內(nèi)加入待檢者5%紅細(xì)胞懸液1滴，陽性對(duì)照小格內(nèi)加入陽性對(duì)照紅細(xì)胞懸液1滴，陰性對(duì)照小格加入陰性對(duì)照紅細(xì)胞懸液1滴；

④用干凈玻棒攪拌紅細(xì)胞懸液和試劑血清充分混合；

⑤連續(xù)輕輕傾斜轉(zhuǎn)動(dòng)平板，一般在2min內(nèi)觀察結(jié)果，或按試劑說明書規(guī)定的時(shí)間觀察結(jié)果。