檢驗(yàn)師考點(diǎn):凝血因子的檢測(cè)
凝血因子的檢測(cè),快來(lái)跟著小編了解一下吧!
1.血漿纖維蛋白原(fibrinogen,F(xiàn)IB)含量測(cè)定
(1)原理:FIB檢測(cè)有凝血酶凝固法(Clauss法)、比濁法(PT衍生法)以及免疫學(xué)的方法等。
①Clauss法:以凝血酶作用于待測(cè)血漿中的FIB,使其轉(zhuǎn)變?yōu)槔w維蛋白,血漿凝固。血漿中FIB的含量與凝固時(shí)間呈負(fù)相關(guān),檢測(cè)結(jié)果與參比血漿制成的標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)比可得出纖維蛋白原的含量。
②PT衍生法:當(dāng)PT測(cè)定完成時(shí),纖維蛋白原轉(zhuǎn)變?yōu)槔w維蛋白,其形成的濁度與FIB的含量成正比,因此無(wú)需另加任何試劑,即可由產(chǎn)生的濁度,用終點(diǎn)法或速率法算出FIB含量。
③免疫學(xué)方法:是利用抗FIB多克隆抗體與FIB特異性結(jié)合反應(yīng)進(jìn)行測(cè)定。方法有免疫濁度、單向免疫擴(kuò)散和ELISA等。
(2)臨床意義:增高見(jiàn)于糖尿病、急性心肌梗死、急性傳染病、結(jié)締組織病、急性腎炎、多發(fā)性骨髓瘤、休克、大手術(shù)后、妊高征、急性感染、惡性腫瘤和應(yīng)急狀態(tài)等。
降低見(jiàn)于先天性低或無(wú)FIB血癥、遺傳性FIB異常、彌散性血管內(nèi)凝血(DIC)、原發(fā)性纖溶癥、重癥肝炎和肝硬化等。
(3)方法學(xué)評(píng)價(jià):Clauss法和PT衍生法:測(cè)定的是纖維蛋白原的功能,由于FIB的異質(zhì)性,當(dāng)FDP增高時(shí),Clauss法測(cè)定結(jié)果會(huì)受到影響;免疫學(xué)方法測(cè)定的是纖維蛋白原的含量。
2.血漿因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ和Ⅻ的促凝活性測(cè)定
(1)原理:一期法是將待測(cè)血漿分別與乏FⅧ、FⅨ、FⅪ和FⅫ基質(zhì)血漿混合,進(jìn)行APTT測(cè)定。將正常人混合血漿與乏因子血漿混合,測(cè)定APTT,作出標(biāo)準(zhǔn)曲線。從各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線中分別計(jì)算出受檢血漿中FⅧ:C、FⅨ:C、FⅪ:C和FⅫ:C相當(dāng)于正常人的百分率(%)。
(2)臨床意義
1)增高:主要見(jiàn)于血栓前狀態(tài)和血栓性疾病,如靜脈血栓形成、肺栓塞、妊娠高血壓疾病、晚期妊娠、口服避孕藥、腎病綜合征、惡性腫瘤等。
2)減低:
FⅧ:C減低見(jiàn)于血友病A、血管性血友病、血中存在因子Ⅷ抗體、DIC;
FⅨ:C減低見(jiàn)于血友病B、肝臟病、維生素K缺乏癥、DIC、口服抗凝藥物;
FⅪ:C減低見(jiàn)于因子Ⅺ缺乏癥、肝臟疾病、DIC等;
FⅫ:C減低見(jiàn)于先天性因子Ⅻ缺乏癥、肝臟疾病、DIC和某些血栓性疾病等。
(3)注意事項(xiàng)
1)FⅧ:C:在嚴(yán)重肝實(shí)質(zhì)損傷時(shí),F(xiàn)Ⅷ:C可明顯升高。FⅧ:C減低時(shí),需與vWF含量同時(shí)測(cè)定,以篩選出vWF缺陷的可能。
2)目前認(rèn)為,凝血因子促凝活性測(cè)定不必等待逐級(jí)篩選和糾正試驗(yàn)的結(jié)果,可以在單純APTT延長(zhǎng)時(shí)檢測(cè)。
3)受檢標(biāo)本檢測(cè)凝固時(shí)間不在標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍可稀釋后檢測(cè)。
3.血漿因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ和Ⅹ的促凝活性測(cè)定
(1)原理:將待測(cè)血漿分別與缺乏FⅡ、FⅤ、FⅦ和FⅩ基質(zhì)血漿混合,進(jìn)行PT測(cè)定。將正常人混合血漿與乏因子血漿混合,測(cè)定PT,作出標(biāo)準(zhǔn)曲線。從各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線中分別計(jì)算出受檢血漿中FⅡ:C、FⅤ:C、FⅦ:C和FⅩ:C相當(dāng)于正常人的百分率(%)。
(2)臨床意義
1)增高:見(jiàn)于血栓前狀態(tài)和血栓性疾病。
2)減低:見(jiàn)于維生素K缺乏癥(FV除外)、肝臟疾病、DIC、口服抗凝劑和血中存在相應(yīng)的抑制物。先天性因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ和Ⅹ缺乏癥較罕見(jiàn)。
目前因子FⅡ:C、FⅤ:C、FⅦ:C和FⅩ:C的測(cè)定主要用于肝臟受損的檢查,因子Ⅶ:C在肝臟早期可下降,因子Ⅴ的測(cè)定在肝損傷和肝移植中應(yīng)用較多。
4.血漿因子ⅩⅢ定性試驗(yàn)
(1)原理:在鈣離子作用下,因子ⅩⅢ能使溶解于尿素溶液的可溶性纖維蛋白單體聚合物變?yōu)椴蝗苄缘睦w維蛋白。因此,含因子ⅩⅢ的血漿鈣化凝固后不再溶于尿素溶液中,而缺乏ⅩⅢ的血漿聚合物則可溶于5mol/L尿素溶液中。
(2)臨床意義:本試驗(yàn)簡(jiǎn)單、可靠,是十分有用的過(guò)篩試驗(yàn)。
在臨床上若發(fā)現(xiàn)傷口愈合緩慢、滲血不斷或懷疑有因子ⅩⅢ缺陷者,可首選本試驗(yàn)。若纖維蛋白在24h內(nèi),尤其是2h內(nèi)完全溶解,表示因子ⅩⅢ缺乏,見(jiàn)于先天性因子ⅩⅢ缺乏或獲得性因子ⅩⅢ缺乏,后者見(jiàn)于肝臟疾病、SLE、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、惡性淋巴瘤、轉(zhuǎn)移性肝癌、DIC及原發(fā)性纖溶等。
5.血漿因子ⅩⅢ亞基抗原測(cè)定
(1)原理:凝血因子ⅩⅢ由兩個(gè)亞基α和β構(gòu)成。檢測(cè)方法為免疫火箭電泳法:在含有FⅩⅢα亞基和β亞基抗血清的瓊脂凝膠板中,加入受檢血漿(抗原),在電場(chǎng)作用下,出現(xiàn)抗原-抗體反應(yīng)形成的火箭樣沉淀峰,此峰的高度與受檢血漿中FⅩⅢ亞基的濃度成正比。根據(jù)沉淀峰的高度,從標(biāo)準(zhǔn)曲線中計(jì)算出FⅩⅢα:Ag和FⅩⅢβ:Ag相當(dāng)于正常人的百分率(%)。
(2)臨床意義:同上。
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