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    什么是層析法分類呢?

    2020-05-11 19:58 來源:醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)
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    什么是層析法分類呢?跟著小編來學(xué)習(xí)一下吧!

    按層析原理還可將層析分為:凝膠層析、離子交換層析、高效液相層析、親和層析。

    1.凝膠層析

    又稱分子篩過濾或排阻層析等。

    固定相是多孔凝膠,各組分的分子大小不同,因而在凝膠上受阻滯的程度(移動(dòng)速度)也不同。

    優(yōu)點(diǎn):所用凝膠屬于惰性載體,吸附力弱,操作條件溫和,不需要有機(jī)溶劑,對(duì)高分子物質(zhì)有很好的分離效果。

    常用的凝膠有Sephadex G(葡聚糖凝膠)系列。

    凝膠層析可用于脫鹽、分離提純、測(cè)定高分子物質(zhì)的分子量、高分子溶液的濃縮等。

    2.離子交換層析

    采用具有離子交換性能的物質(zhì)作固定相,利用它與流動(dòng)相中的離子能進(jìn)行可逆交換的性質(zhì)來分離離子型化合物的方法。

    主要用于分離氨基酸、多肽及蛋白質(zhì),也可用于分離核酸、核苷酸及其他帶電荷的生物分子。

    3.高效液相層析

    在經(jīng)典液相層析法基礎(chǔ)上,引進(jìn)氣相層析的理論而發(fā)展起來的一項(xiàng)新穎快速的分離技術(shù)。

    具有分離能力強(qiáng)、測(cè)定靈敏度高、可在室溫下進(jìn)行、應(yīng)用范圍廣等優(yōu)點(diǎn),對(duì)分離蛋白質(zhì)、核酸、氨基酸、生物堿、類固醇和類脂等尤其有利。

    根據(jù)流動(dòng)相和固定相相對(duì)極性,高效液相色譜分析可分為正相和反相兩種。

    4.親和層析

    利用待分離物質(zhì)和它的特異性配體間具有特異的親和力,從而達(dá)到分離的目的。

    將可親和的一對(duì)分子中的一方以共價(jià)鍵形式與不溶性載體相連作為固定相吸附劑,當(dāng)含混合組分的樣品通過此固定相時(shí),只有和固定相分子有特異親和力的物質(zhì)才能被固定相吸附結(jié)合,無關(guān)組分隨流動(dòng)相流出。

    改變流動(dòng)相組分,可將結(jié)合的親和物洗脫下來。

    親和層析中所用的載體稱為基質(zhì),與基質(zhì)共價(jià)連接的化合物稱配基。

    具有專一親和力的生物分子對(duì)主要有:

    抗原與抗體,DNA與互補(bǔ)DNA或RNA,酶與底物,激素與受體,維生素與特異結(jié)合蛋白,糖蛋白與植物凝集素等。

    親和層析可用于純化生物大分子、稀釋液的濃縮、不穩(wěn)定蛋白質(zhì)的貯藏、分離核酸等。

    以上是小編為大家整理的內(nèi)容,希望對(duì)大家有所幫助,更多關(guān)于臨床檢驗(yàn)主管技師的資訊請(qǐng)關(guān)注醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)! 

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