免疫學(xué)檢驗中標(biāo)本的正確收集及處理方法是什么呢?
免疫學(xué)檢驗中標(biāo)本的正確收集及處理方法是什么呢?為了幫助更多考生了解,醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)為大家搜集整理如下:
用于免疫檢驗的臨床標(biāo)本最為常用的是血清(漿)。對用于激素和治療藥物測定的血清標(biāo)本,要注意收集時間甚至體位對測定結(jié)果的影響。用于傳染性病原體的抗原和抗體、腫瘤標(biāo)志物和特種蛋白等檢測的血清標(biāo)本無此影響,但可能存在干擾因素。
(一)內(nèi)源性干擾因素
包括類風(fēng)濕因子、補體、高濃度的非特異免疫球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體、因使用鼠抗體治療或診斷誘導(dǎo)的抗鼠Ig抗體、交叉反應(yīng)物質(zhì)等。
1.類風(fēng)濕因子(RF) 為避免RF的干擾,需采?。?/strong>
(1)改變標(biāo)記抗體。
(2)標(biāo)本中RF用變性IgG預(yù)先封閉:將經(jīng)熱變性(63℃,10分鐘)的兔、羊等的IgG加入到標(biāo)本稀釋液中,或是將該變性IgG連接至一顆粒固相如聚苯乙烯微球或微孔,然后加入臨床血清標(biāo)本,反應(yīng)后,再吸出標(biāo)本進行檢測。此外,在測定特異IgM時,也可使用抗人IgG去除臨床標(biāo)本中RF和IgG。
(3)測定抗原時,可在標(biāo)本中加入可使RF降解的還原劑如2-巰基乙醇。
2.補體 由補體引起的干擾可通過下述方法避免:
(1)對臨床血清標(biāo)本加熱滅活補體。
(2)包被或標(biāo)記二抗使用特異的雞抗體。
3.異嗜性抗體 人類血清中含有抗嚙齒類動物(如鼠等)的Ig的抗體,即天然異嗜性抗體。異嗜性抗體可通過交聯(lián)固相和標(biāo)記的單抗或多抗而出現(xiàn)假陽性反應(yīng)。可通過下述方法避免:
(1)使用特異的兔F(ab')2片段作為固相或測定標(biāo)記抗體。
(2)在標(biāo)本或標(biāo)本稀釋液中加入過量的動物Ig,封閉可能存在的異嗜性抗體。但加入量不足或亞類不同時無效。
(3)使用靶特異的非Ig親和蛋白替代固相或標(biāo)記抗體之一。
(4)使用特異的雞抗體作為固相和測定抗體。
4.由抗鼠抗體引起的干擾可通過下述方法避免:
(1)使用特異的抗體F(ab')2片段作為固相或測定標(biāo)記抗體。
(2)在標(biāo)本或標(biāo)本稀釋液中加入過量的鼠Ig,封閉可能存在的抗鼠抗體。
(3)使用特異的雞抗體IgG作為固相和測定抗體。雞抗體IgG不與人抗鼠抗體反應(yīng)。因而,用其作為固相或標(biāo)記抗體不會出現(xiàn)假陽性結(jié)果。
(二)外源性干擾因素
包括標(biāo)本溶血、標(biāo)本被細(xì)菌污染、標(biāo)本貯存時間過長、反復(fù)凍融和標(biāo)本凝固不全等。
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