B細(xì)胞功能檢測(cè)都有哪些方法呢？為了幫助更多考生了解，醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)為大家搜集整理如下：

B細(xì)胞主要產(chǎn)生Ig參與機(jī)體體液免疫應(yīng)答，B細(xì)胞功能低下或缺乏者對(duì)外源性抗原刺激的應(yīng)答能力減弱或缺陷，特異性抗體產(chǎn)生減少或缺如。

（一）B細(xì)胞增殖試驗(yàn)：小鼠B細(xì)胞可用細(xì)菌脂多糖（LPS）作為刺激物，人則用含SPA的金黃色葡萄球菌菌體及抗IgM抗體等刺激。

（二）溶血空斑試驗(yàn)

1.原理：將SRBC免疫的小鼠脾臟（或家兔淋巴結(jié)）制成單個(gè)細(xì)胞懸液，與SRBC在瓊脂糖凝膠內(nèi)混合后傾注于小平皿或玻片上。脾細(xì)胞中的抗體生成細(xì)胞釋放抗SRBC抗體，使其周圍的SRBC致敏，在補(bǔ)體參與下可將SRBC溶解，形成肉眼可見的溶血空斑。每一個(gè)空斑中央含一個(gè)抗體形成細(xì)胞，空斑數(shù)目即為抗體形成細(xì)胞數(shù)?？瞻叽笮”硎究贵w形成細(xì)胞產(chǎn)生抗體的多少。

2.方法學(xué)

（1）經(jīng)典溶血空斑形成試驗(yàn)：用于檢測(cè)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物抗體形成細(xì)胞的功能。直接法測(cè)到的細(xì)胞為IgM類抗體形成細(xì)胞；間接法在小鼠脾細(xì)胞和SRBC混合時(shí)，再加抗鼠Ig抗體，使抗體產(chǎn)生細(xì)胞所產(chǎn)生的IgG或IgA與抗Ig抗體結(jié)合成復(fù)合物，此時(shí)能活化補(bǔ)體導(dǎo)致溶血。只能檢測(cè)抗RBC抗體的產(chǎn)生細(xì)胞，難以檢測(cè)人類的抗體產(chǎn)生情況。

（2）被動(dòng)溶血空斑試驗(yàn)：是指抗體形成細(xì)胞產(chǎn)生的Ig與SRBC上的抗原結(jié)合，在補(bǔ)體參與下出現(xiàn)溶血反應(yīng)。將吸附有已知抗原的SRBC、待檢B細(xì)胞、補(bǔ)體及適量瓊脂糖液混合，傾注平皿，溫育1～3小時(shí)后，形成肉眼可見的溶血空斑。該試驗(yàn)可檢測(cè)SRBC上抗原相應(yīng)的抗體形成細(xì)胞，因此應(yīng)用范圍較廣。

3.臨床應(yīng)用與評(píng)價(jià)：溶血空斑試驗(yàn)主要用于測(cè)定藥物和手術(shù)等因素對(duì)體液免疫功能的影響，評(píng)價(jià)免疫治療或免疫重建后機(jī)體產(chǎn)生抗體的能力。

（三）酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)試驗(yàn)（ELISPOT）

1.原理：用抗原包被固相載體，加入待檢的抗體產(chǎn)生細(xì)胞，即可誘導(dǎo)抗體的分泌。分泌的抗體與包被抗原結(jié)合，在抗體分泌細(xì)胞周圍形成抗原抗體復(fù)合物，使細(xì)胞吸附于載體上，加入酶標(biāo)記的第二抗體與細(xì)胞上的抗體結(jié)合，通過底物顯色反應(yīng)的深淺，可測(cè)定出生成的抗體量，并可在鏡下計(jì)數(shù)著色的斑點(diǎn)形成細(xì)胞。

2.應(yīng)用與方法學(xué)評(píng)價(jià)

該方法既可檢測(cè)抗體分泌細(xì)胞，又可檢測(cè)抗體分泌量。其優(yōu)點(diǎn)是穩(wěn)定、特異、抗原用量少；可同時(shí)檢測(cè)不同抗原誘導(dǎo)的不同抗體分泌，并可定量；可檢測(cè)組織切片中分泌抗體的單個(gè)細(xì)胞。

（四）體內(nèi)實(shí)驗(yàn)

B細(xì)胞功能減低或缺陷，可表現(xiàn)為體內(nèi)Ig和血型抗體量下降或缺如。常用于體內(nèi)抗體產(chǎn)生的特異性抗原有白喉類毒素、破傷風(fēng)類毒素、多價(jià)肺炎鏈球菌菌苗等。將適量抗原皮下或肌內(nèi)注射免疫，并于免疫前及免疫后1、2、3周分別采血，分離血清，測(cè)定受檢者免疫前后相應(yīng)抗體的效價(jià)，判斷受檢者體內(nèi)B細(xì)胞的功能。

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