雜交瘤技術的基本原理是什么?
雜交瘤技術的基本原理是檢驗職稱考試需要掌握的內容,醫(yī)學教育網(wǎng)小編為大家搜集整理如下,希望可以幫助大家復習掌握。
雜交瘤技術的基本原理是通過融合兩種細胞而同時保持兩者的主要特征。這兩種細胞分別是經(jīng)抗原免疫的小鼠脾細胞和小鼠骨髓瘤細胞。被特異性抗原免疫的小鼠脾細胞(B淋巴細胞)的主要特征是它的抗體分泌功能,但不能在體外連續(xù)培養(yǎng),小鼠骨髓瘤細胞則可在培養(yǎng)條件下無限分裂、增殖,即具有所謂永生性。在選擇培養(yǎng)基的作用下,只有B細胞與骨髓瘤細胞融合的雜交細胞才能具有持續(xù)培養(yǎng)的能力,形成同時具備抗體分泌功能和保持細胞永生性兩種特征的細胞克隆。
一、B細胞雜交瘤技術
二、T細胞雜交瘤
三、陽性雜交瘤細胞的克隆化培養(yǎng)
雜交瘤細胞形成后的初期很不穩(wěn)定,為確保單克隆抗體的專一性及避免其他陰性細胞對其生長影響,必須將陽性雜交瘤細胞進行單細胞分離培養(yǎng),產(chǎn)生單克隆雜交瘤細胞,經(jīng)2~3次檢測均為陽性的雜交瘤單個細胞,才能進行克隆化培養(yǎng)。
克隆化培養(yǎng)后的陽性雜交瘤細胞應及時凍存,最好保存在-196℃液氮中。
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