AB0血型鑒定的原理
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1.原理 常用鹽水凝集法檢測紅細(xì)胞上存在的血型抗原,以及血清中存在的血型抗體,依據(jù)抗原抗體存在的情況判定血型。
常規(guī)的方法有:
①正向定型:用已知抗體的標(biāo)準(zhǔn)血清檢查紅細(xì)胞上未知的抗原。
②反向定型:用已知血型的標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞檢查血清中未知的抗體。
結(jié)果判定:凡紅細(xì)胞出現(xiàn)凝集者為陽性,呈散在游離狀態(tài)為陰性。
紅細(xì)胞的常規(guī)AB0定型
正向定型 | 反向定型 | 血型 | ||||
抗-A | 抗-B | 抗-AB | A細(xì)胞 | B細(xì)胞 | O細(xì)胞 | |
- | - | - | + | + | - | O |
+ | - | + | - | + | - | A |
- | + | + | + | - | - | B |
+ | + | + | - | - | - | AB |
2.鑒定方法
(1)生理鹽水凝集法
①玻片法
操作簡單,適于大量標(biāo)本檢查,但反應(yīng)時間長;被檢查者如血清抗體效價低,則不易引起紅細(xì)胞凝集,因此,不適于反向定型。
②試管法
由于離心作用可加速凝集反應(yīng),故反應(yīng)時間短,借助于離心力可以使紅細(xì)胞接觸緊密,促進(jìn)凝集作用,適于急診檢查。
玻片法凝集結(jié)果判斷
呈一片或幾片凝塊,僅有少數(shù)單個游離紅細(xì)胞 | ++++ |
呈數(shù)個大顆粒狀凝塊,有少數(shù)單個游離紅細(xì)胞 | +++ |
數(shù)個小凝集顆粒和一部分微細(xì)凝集顆粒,游離紅細(xì)胞約占1/2 | ++ |
肉眼可見無數(shù)細(xì)沙狀小凝集顆粒。于鏡下觀察,每凝集團(tuán)中有5~8個以上紅細(xì)胞凝集 | + |
可見數(shù)個紅細(xì)胞凝集在一起,周圍有很多的游離紅細(xì)胞 | ± |
可見極少數(shù)紅細(xì)胞凝集,而大多數(shù)紅細(xì)胞仍呈分散分布 | 混合凝集外觀 |
鏡下未見細(xì)胞凝集,紅細(xì)胞均勻分布 | - |
(2)凝膠微柱法
是紅細(xì)胞抗原與相應(yīng)抗體在凝膠微柱介質(zhì)中發(fā)生凝集反應(yīng)的免疫學(xué)方法。血型抗體為單克隆抗體,加入試劑、標(biāo)本,用專用離心機(jī)離心后可直接用肉眼觀察結(jié)果或用血型儀分析。此法操作標(biāo)準(zhǔn)化,定量加樣,確保結(jié)果準(zhǔn)確性。
3.抗A、抗B和抗AB標(biāo)準(zhǔn)血清
標(biāo)準(zhǔn)血清均采自健康人,并應(yīng)符合下述條件:
①特異性:只能與相應(yīng)的紅細(xì)胞抗原發(fā)生凝集,無非特異性凝集。
②效價:我國標(biāo)準(zhǔn)抗A和抗B血清效價均在1:128以上。
③親和力:我國標(biāo)準(zhǔn)要求抗A對A1、A2及A2B發(fā)生反應(yīng)開始出現(xiàn)凝集的時間分別是15s、30s和45s;抗B對B型紅細(xì)胞開始出現(xiàn)凝集的時間為15s。凝集強(qiáng)度為3min時,凝塊不小于1mm2。
④冷凝集素效價:在1:4以下。⑤無菌。⑥滅活補(bǔ)體。
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