網(wǎng)織細胞計數(shù)的操作方法
網(wǎng)織細胞計數(shù)的操作方法,快來跟著小編了解一下吧!
1.顯微鏡試管法操作
(1)加染液:于試管中加入10g/L煌焦油藍生理鹽水溶液2滴,再加新鮮血2滴,立即混勻,置37℃下15~20min。
(2)制片:取1小滴制成薄血涂片,自然干燥。
(3)觀察:在低倍鏡下選擇紅細胞分布均勻的部位進行觀察。
(4)計數(shù):在油鏡下計數(shù)至少1000個紅細胞中網(wǎng)織紅細胞數(shù)。
(5)計算:
網(wǎng)織紅細胞分數(shù)=(計數(shù)的網(wǎng)織紅細胞數(shù))/1O00,
網(wǎng)織紅細胞絕對值(×109/L)=紅細胞數(shù)×1012/L×網(wǎng)織紅細胞分數(shù)。
2.顯微鏡法注意事項
(1)網(wǎng)織紅細胞必須活體染色,WH0推薦使用新亞甲藍染液,其染色力強且穩(wěn)定。煌焦油藍染液操作簡單、費用低廉,但易產(chǎn)生沉淀、工作效率不高、精度差。染液與血液比例以1:1為宜,嚴重貧血時,可適量增加血量。
(2)為提高網(wǎng)織紅細胞計數(shù)精度和速度,ICSH推薦使用Miller窺盤,方法是將Miller窺盤置于目鏡內(nèi),選擇紅細胞散在且分布均勻的部位。
(3)用小方格(A)計數(shù)紅細胞,大方格(B)計數(shù)網(wǎng)織紅細胞,按下式計算:
(4)注意鑒別網(wǎng)織紅細胞與HbH包涵體。Ret為藍綠色網(wǎng)狀或點粒狀物質(zhì),分布不均,HbH包涵體為藍綠色圓形小體,均勻散布于整個紅細胞內(nèi)。
【方法學(xué)評價】
1.普通光學(xué)顯微鏡法
試管法操作簡便、重復(fù)性較好。玻片法取血量少、染色時水分易蒸發(fā),造成結(jié)果偏低。但顯微鏡法受主觀因素影響較多,且耗時費力。
2.網(wǎng)織細胞計數(shù)儀法
可客觀地將Ret分成高熒光強度網(wǎng)織紅細胞(HFR)、中熒光強度網(wǎng)織紅細胞(MFR)、低熒光強度網(wǎng)織紅細胞(LFR)3類,有助于化療、放療、移植患者的監(jiān)測。
3.血液分析儀法
網(wǎng)織紅細胞絕對值(Ret)、網(wǎng)織紅細胞百分比(Ret%)、網(wǎng)織紅細胞分布寬度(RDWr)、網(wǎng)織紅細胞平均體積(MCVr/MRV)、網(wǎng)織紅細胞血紅蛋白濃度(HCr)、網(wǎng)織紅細胞平均血紅蛋白濃度(MCHCr)、網(wǎng)織紅細胞血紅蛋白分布寬度(HDWr)、LFR、MFR、HFR、網(wǎng)織紅細胞成熟指數(shù)(RMI,RMI=(MFR+HFR)/LFR×100)。
儀器法優(yōu)點是測量細胞多,避免主觀因素,方法易于標準化。
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