流式細胞儀分析技術的工作原理是什么?
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流式細胞儀由液流系統(tǒng)、光學與信號轉(zhuǎn)換測試系統(tǒng)和信號處理及放大的計算機系統(tǒng)三大基本結(jié)構(gòu)組成。
工作原理:
采用激光作為激發(fā)光源,保證其具有更好的單色性與激發(fā)效率;利用熒光染料與單克隆抗體技術結(jié)合的標記技術,保證檢測的靈敏度和特異性;用計算機系統(tǒng)對流動的單細胞懸液中單個細胞的多個參數(shù)信號進行數(shù)據(jù)處理分析,保證了檢測速度與統(tǒng)計分析的精確性。
標記了特異性熒光染料的單細胞懸液和鞘液,分別經(jīng)硅化管進入流動室,形成鞘液包裹細胞懸液的穩(wěn)態(tài)單細胞液柱,液柱與水平方向的激光束垂直相交,單個細胞上標記的熒光染料在通過激光光斑時被激發(fā)而產(chǎn)生特異性熒光,同時,由于混合細胞群中因細胞大小和胞內(nèi)顆粒多少的不同會被激發(fā)而產(chǎn)生不同的散射光。
一臺好的流式細胞儀每秒可測量15000個細胞,測定1000個熒光染料分子的粒子。
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