噬菌體抗體庫技術的基本原理和程序是什么?
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將體外克隆的抗體基因片段插入噬菌體載體,轉染工程細菌進行表達,然后用抗原篩選即可獲得特異的單克隆噬菌體抗體。
利用這一技術可以得到完全人源性的抗體,在HIV等病毒感染和腫瘤的診斷與治療方面有其獨特的優(yōu)越性。
基本原理和程序:
構建噬菌體抗體庫通常包括以下幾個過程:
1.從外周血或脾、淋巴結等組織中分離B淋巴細胞,提取mRNA并反轉錄為cDNA;
2.應用抗體輕鏈和重鏈引物,根據(jù)建庫的需要通過PCR技術擴增不同的Ig基因片段;
3.構建噬菌體載體;
4.表達載體轉化細菌,構建全套抗體庫。
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