細(xì)菌染色標(biāo)本檢查常用的染色方法
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細(xì)菌染色的基本程序:涂片(干燥)→固定→染色(初染→媒染→脫色→復(fù)染)。
1.單染色法:用一種染料將細(xì)菌和周圍物體染成同一種顏色。細(xì)菌經(jīng)單染色法處理后,可觀察其形態(tài)、排列、大小及簡(jiǎn)單的結(jié)構(gòu),但不能顯示各種細(xì)菌染色性的差異。
2.復(fù)染色法:用兩種或兩種以上的染料染色的方法,稱為復(fù)染色法或鑒別染色法。常用的有革蘭染色法和抗酸染色法。
(1)革蘭染色:本法是細(xì)菌學(xué)中最經(jīng)典、最常用的染色方法。除糞便、血液等極少數(shù)標(biāo)本外,絕大多數(shù)標(biāo)本在分離培養(yǎng)之前都要進(jìn)行革蘭染色、鏡檢。
意義:
①鑒別細(xì)菌:通過革蘭染色將所有細(xì)菌分為G+菌和G-菌兩大類,可初步識(shí)別細(xì)菌,縮小范圍,有助于進(jìn)一步鑒定。甚至有時(shí)結(jié)合細(xì)菌特殊形態(tài)結(jié)構(gòu)及排列方式,對(duì)病原菌可進(jìn)行初步鑒定。
②選擇藥物參考:G+菌與G-菌對(duì)一些抗生素表現(xiàn)出不同的敏感性。
③與致病性有關(guān): 大多G+菌的致病物質(zhì)是外毒素,而G-菌大多能產(chǎn)生內(nèi)毒素,兩種致病作用不同。
(2)抗酸染色:抗酸染色也可將細(xì)菌分為兩大類:即抗酸性細(xì)菌和非抗酸性細(xì)菌。因?yàn)榕R床上絕大多數(shù)病原菌為非抗酸性細(xì)菌,所以抗酸染色不作為臨床上常規(guī)的細(xì)菌檢查項(xiàng)目,只針對(duì)性用于結(jié)核病、麻風(fēng)病等的細(xì)菌檢查。
疑似結(jié)核分枝桿菌感染的標(biāo)本,經(jīng)抗酸染色后以油鏡檢查,即可作出初步鑒定。若查見紅色抗酸桿菌,可報(bào)告為“找到抗酸分枝桿菌”。對(duì)臨床疾病的診斷和治療具有重要參考價(jià)值。
3.熒光染色:熒光染色法敏感性強(qiáng),效率高而且容易觀察結(jié)果,在臨床細(xì)菌鑒定中有很大的實(shí)用價(jià)值。主要用于結(jié)核分枝桿菌、麻風(fēng)分枝桿菌、白喉棒狀桿菌及痢疾志賀菌等的檢測(cè)。
如痰標(biāo)本涂片、固定,用熒光染料金胺0法(也稱金胺0-羅丹明B法)染色,以熒光顯微鏡檢查,在暗背景中可觀察到呈金黃色熒光的菌球。
除以上所述染色方法外,用于細(xì)菌鑒定的還有鞭毛染色、異染顆粒染色等。
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