免疫透射比濁法的原理與方法評(píng)價(jià)
免疫透射比濁法的原理與方法評(píng)價(jià)是什么?為了幫助檢驗(yàn)職稱考生了解,醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)為大家整理如下:
(一)原理
可溶性抗原抗體反應(yīng)后形成的免疫復(fù)合物,使介質(zhì)濁度發(fā)生改變,光線通過(guò)抗原抗體反應(yīng)后的溶液時(shí),被其中的免疫復(fù)合物微粒吸收,在保持抗體過(guò)量的情況下,吸光度(A值)與免疫復(fù)合物量呈正相關(guān)。與已知濃度的抗原標(biāo)準(zhǔn)品相比較,可確定標(biāo)本中抗原的含量。
儀器工作過(guò)程
1.將待檢標(biāo)本和抗原參考品作適當(dāng)稀釋。
2.將待測(cè)標(biāo)本和標(biāo)準(zhǔn)抗原溶液(5個(gè)濃度抗原標(biāo)準(zhǔn)品)與適當(dāng)過(guò)量的抗血清混合,在一定條件下,抗原抗體反應(yīng)完成后,在340nm處測(cè)定各管吸光度。
3.按方程進(jìn)行曲線擬合,制備劑量-反應(yīng)曲線,由計(jì)算機(jī)處理,計(jì)算出抗原濃度。
(二)方法評(píng)價(jià)
1.優(yōu)點(diǎn):靈敏度比單擴(kuò)法高,操作簡(jiǎn)便,結(jié)果準(zhǔn)確,且能用全自動(dòng)或半全自動(dòng)生化分析儀進(jìn)行檢測(cè)。
2.不足:①抗體用量較大;②溶液中IC分子若過(guò)小則阻擋不了光線的通過(guò);若數(shù)量太少則對(duì)光通量影響不大;靈敏度較散射比濁法低;③透射比濁測(cè)定在抗原-抗體反應(yīng)的第二階段,檢測(cè)需在抗原-抗體反應(yīng)達(dá)到平衡后進(jìn)行,耗時(shí)較長(zhǎng)。
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