必看知識點：熒光物質(zhì)常見考點小結(jié)

2020-06-09 16:48 來源：醫(yī)學教育網(wǎng)

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熒光物質(zhì)是檢驗職稱考試會涉及的內(nèi)容，為了幫助各位考生了解，醫(yī)學教育網(wǎng)為大家搜集整理如下：

熒光物質(zhì)

（一）熒光色素

許多物質(zhì)都可產(chǎn)生熒光現(xiàn)象，但并非都可用作熒光色素。只有那些能產(chǎn)生明顯的熒光并能作為染料使用的有機化合物才能稱為免疫熒光色素或熒光染料。常用的熒光色素有：

1.異硫氰酸熒光素（FITC）　為黃色或橙黃色結(jié)晶粉末，易溶于水或乙醇等溶劑。分子量為389.4kD，最大吸收光波長為490～495nm，最大發(fā)射光波長為520～530nm，呈現(xiàn)明亮的黃綠色熒光。其主要優(yōu)點是：①人眼對黃綠色較為敏感；②通常切片標本中的綠色熒光少于紅色熒光。

2.四乙基羅丹明（RB200）　為橘紅色粉末，不溶于水，易溶于乙醇和丙酮。性質(zhì)穩(wěn)定，可長期保存。最大吸收光波長為570nm，最大發(fā)射光波長為595～600nm，呈橘紅色熒光。

3.四甲基異硫氰酸羅丹明（TRITC）　最大吸引光波長為550nm，最大發(fā)射光波長為620nm，呈橙紅色熒光。與FITC的翠綠色熒光對比鮮明，可配合用于雙重標記或?qū)Ρ热旧?。其異硫氰基可與蛋白質(zhì)結(jié)合，但熒光效率較低。

4.藻紅蛋白（R-RE）　本品為無定形，褐紅色粉末，不溶于水，易溶于乙醇和丙酮，性質(zhì)穩(wěn)定，可長期保存。最大吸引光波長為565nm，最大發(fā)射光波長為578nm，呈明亮的橙色熒光。與FITC的翠綠色熒光對比鮮明，故被廣泛用于對比染色或用于兩種不同顏色的熒光抗體的雙重染色。

（二）其他熒光物質(zhì)

1.鑭系螯合物　某些三價稀土鑭系元素如銪（Eu3＋）、鋱（Tb3＋）、鈰（Ce3＋）等的螯合物經(jīng)激發(fā)后也可發(fā)射特征性的熒光，其中以Eu3＋應(yīng)用最廣。Eu3＋螯合物的激發(fā)光波長范圍寬，發(fā)射光波長范圍窄，熒光衰變時間長，最適合用于時間分辨熒光免疫測定。

2.酶作用后產(chǎn)生熒光的物質(zhì)　某些化合物本身無熒光效應(yīng)，一旦經(jīng)酶作用便形成具有強熒光的物質(zhì)。例如4-甲基傘酮-β-D半乳糖苷，受β-半乳糖苷酶的作用分解成4-甲基傘酮，后者可發(fā)出熒光，激發(fā)光波長為360nm，發(fā)射光波長為450nm。其他如堿性磷酸酶的底物是4-甲基傘酮磷酸鹽，辣根過氧化物酶的底物是對羥基苯乙酸等。