檢驗士:《答疑周刊》2019年第24期:
《微生物學及檢驗》重要考點(一)
1.微生物的特點:①多數(shù)以獨立生活的單細胞和細胞群體的形式存在;②新陳代謝能力旺盛,生長繁殖速度快;③變異快,適應能力強;④種類多、分布廣、數(shù)量大;⑤個體微小。
2.微生物的分類:
①原核細胞型微生物:僅有原始核,無核膜、無核仁,染色體僅為單個裸露的DNA分子,不進行有絲分裂,缺乏完整的細胞器。屬于這類微生物的有細菌、放線菌、螺旋體、支原體、衣原體、立克次體。
②真核細胞型微生物:細胞核分化程度較高,有典型的核結構(有核膜、核仁、多個染色體,由DNA和組蛋白組成),通過有絲分裂進行繁殖。胞漿內有多種完整的細胞器。屬于這類微生物的有真菌和原蟲。
③非細胞型微生物:結構最簡單,體積最微小,能通過細菌濾器,無細胞結構,由單一核酸(DNA或RNA)和蛋白質外殼組成,無產生能量的酶系統(tǒng)。必須寄生在活的易感細胞內生長繁殖。這類微生物有病毒、亞病毒和朊粒。
3.細菌形體微小,通常以微米為測量單位。菌齡與環(huán)境等因素對菌體大小有影響。
4.細菌的基本結構:細胞壁、細菌膜、細胞質和核質等。
細菌的特殊結構:莢膜、鞭毛、菌毛和芽胞。
5.鞭毛是細菌的運動器官,細菌能否運動可用于鑒定。
6.細菌L型:生長緩慢,營養(yǎng)要求高,對滲透壓敏感,普通培養(yǎng)基上不能生長,培養(yǎng)時必須用高滲的含血清的培養(yǎng)基。細菌L型在該培養(yǎng)基中能緩慢生長,可形成三種類型的菌落:①油煎蛋樣菌落;②顆粒型菌落;③絲狀菌落。
7.細菌個體的生長繁殖:細菌一般是以二分裂方式進行無性繁殖,個別細菌如結核分枝桿菌可以通過分枝方式繁殖。大多數(shù)細菌繁殖的速度為每20~30min分裂一次,稱為一代,而結核分枝桿菌則需要18~20h才能分裂一次。
8.細菌的生長曲線分為4個時期:①遲緩期;②對數(shù)期;③穩(wěn)定期;④衰亡期。
9.細菌合成代謝產物有:①熱原質;②毒素和侵襲性酶;③色素;④抗生素;⑤細菌素;⑥維生素。
10.S-R變異:指新從患者分離的沙門菌常為光滑型,經人工培養(yǎng)后菌落呈現(xiàn)粗糙型。常伴有抗原、毒力、某些生化特性的改變。
11.毒力變異:有毒力減弱和增強兩種。卡介苗是一株毒力減弱而保留抗原性的變異株,預防接種對人不致病,卻可使人獲得免疫力。
12.基因物質的轉移和重組:
(1)轉化:是受體菌直接攝取供體菌提供的游離DNA片段整合重組,使受體菌的性狀發(fā)生變異的過程。
(2)轉導:是以溫和噬菌體為媒介,將供體菌的基因轉移到受體菌內,導致受體菌基因改變的過程。
(3)接合:是受體菌和供體菌直接接觸,供體菌通過性菌毛將所帶有的F質?;蝾愃七z傳物質轉移至受體菌的過程。
(4)溶原性轉換:是噬菌體的DNA與細菌染色體重組,使宿主菌遺傳結構發(fā)生改變而引起的遺傳型變異。
(5)原生質體融合:兩種經過處理失去細胞壁的原生質體混合可發(fā)生融合,融合后的雙倍體細胞可發(fā)生細菌染色體間的重組。
13.細菌的分類等級:界、門、綱、目、科、屬、種。
14.鱟試驗陽性表明有革蘭染色陰性菌或內毒素血癥,也可用于生物制品或注射液的內毒素污染檢測。
15.暗視野顯微鏡多用于檢查不染色的活細菌和螺旋體的形態(tài)及運動觀察。
16.相差顯微鏡主要用于檢查不染色活細菌的形態(tài)及某些內部結構。
17.細菌染色的基本程序:涂片(干燥)→固定→初染→染色(媒染)→(脫色)→(復染)。
18.常用的堿性染料有堿性復紅、結晶紫、亞甲藍等。
19.常用的酸性染料有伊紅、剛果紅等。
20.電離后顯色離子帶正電荷,易與帶負電荷的被染物結合。由于細菌的等電點在pH2~5之間,在堿性、中性、弱酸性的環(huán)境中細菌均帶負電荷,易與帶正電荷的染料結合而著色。
21.蛋白胨是制備培養(yǎng)基時最常用的成分之一,提供細菌生長繁殖所需要的氮源。
22.培養(yǎng)基種類:
(1)基礎培養(yǎng)基:含有基礎生長所需的基本營養(yǎng)成分,最常用的是肉浸液,俗稱肉湯,主要成分含牛肉浸液和蛋白胨?;A培養(yǎng)基廣泛用于細菌的增菌、檢驗,也是制備其他培養(yǎng)基的基礎成分。
(2)營養(yǎng)培養(yǎng)基:在基礎培養(yǎng)基中可加入葡萄糖、血液、生長因子等特殊成分,供營養(yǎng)要求較高的細菌和需要特殊生長因子的細菌生長。最常用的是血瓊脂平板、巧克力血平板等。
(3)鑒別培養(yǎng)基:利用細菌分解糖類和蛋白質的能力及其代謝產物的不同,在培養(yǎng)基中加入特定的作用底物和指示劑,觀察細菌生長過程中分解底物所釋放的不同產物,通過指示劑的反應不同來鑒別細菌。例如糖發(fā)酵管、克氏雙糖鐵瓊脂(KIA)、伊紅-亞甲藍瓊脂和動力-吲哚-尿素(MIU)培養(yǎng)基等。
(4)選擇培養(yǎng)基:在培養(yǎng)基中加入抑制劑,去抑制標本中的雜菌生長,有助于所選擇的細菌種類的生長。例如培養(yǎng)腸道致病菌的SS瓊脂,其中的膽鹽能抑制革蘭陽性菌,枸櫞酸鈉和煌綠能抑制大腸埃希菌,因而使致病的沙門菌、志賀菌容易分離到。
(5)特殊培養(yǎng)基:包括厭氧培養(yǎng)基和細菌L型培養(yǎng)基等。前者是培養(yǎng)專性厭氧菌的培養(yǎng)基,除含營養(yǎng)成分外,還加入還原劑以降低培養(yǎng)基的氧化還原電勢,如皰肉培養(yǎng)基、巰基乙醇酸鈉培養(yǎng)基等。后者是針對細胞壁缺損的細菌L型,由于胞內滲透壓較高,故培養(yǎng)基必須采用高滲低瓊脂培養(yǎng)基。
23.細菌的接種與分離技術:
(1)常用的平板劃線分離法有以下兩種:①連續(xù)劃線分離法:此法主要用于雜菌不多的標本。②分區(qū)劃線分離法:本法適用于雜菌量較多的標本。
(2)斜面接種法:該法主要用于單個菌落的純培養(yǎng)、保存菌種或觀察細菌的某些特性。
(3)液體接種法:多用于一些液體生化試驗管的接種。
(4)穿刺接種法:此法主要用于半固體培養(yǎng)基、明膠及雙糖管的接種。
(5)傾注平板法:測定牛乳、飲水和尿液等標本細菌數(shù)時常用此方法。
(6)涂布接種法:常用于紙片法藥物敏感性測定,也可用于被檢標本中的細菌計數(shù)。
〖醫(yī)學教育網版權所有,轉載務必注明出處,違者將追究法律責任〗