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    臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技士考試:《答疑周刊》2023年第30期

    2023-04-12 17:04 來源:醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)
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    問題索引:

    1.【問題】免疫比濁法對抗體的要求有哪些?

    2.【問題】PCR實(shí)驗(yàn)室的污染來源有哪些?

    3.【問題】肝功能嚴(yán)重受損時(shí),清蛋白/球蛋白比例應(yīng)該是增高還是降低?

    具體解答:

    1.【問題】免疫比濁法對抗體的要求有哪些?

    【解答】免疫比濁測定法要求抗體的特異性強(qiáng)、效價(jià)高、親和力強(qiáng),并使用R型抗體。

    (1)抗體的特異性。

    (2)抗體的效價(jià)。

    (3)抗體的親和力:親和力是指抗體和抗原結(jié)合[醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)原創(chuàng)]的牢固程度。親和力強(qiáng)則抗體的活性高,不僅可以加快抗原抗體反應(yīng)的速度,而且形成的IC較牢固,不易發(fā)生解離,這在速率比濁法中尤為重要。

    (4)R型和H型抗體:根據(jù)抗血清來源的動(dòng)物種類不同,分為R型抗體和H型抗體。R型抗體是指以家兔為代表的小型動(dòng)物被注射抗原免疫后制備的抗血清。這類抗血清的特點(diǎn)是親和力較強(qiáng),抗原抗體結(jié)合后不易發(fā)生解離,H型抗體是指以馬為代表的大型動(dòng)物注射抗原后制備的抗血清,這類抗血清的親和力弱,抗原抗體結(jié)合后極易解離。

    2.【問題】PCR實(shí)驗(yàn)室的污染來源有哪些?

    【解答】①樣本間交叉污染:收集樣本的容器被污染或樣本密封不嚴(yán)外溢;不同樣本移液時(shí)忘記更換槍尖或未使用帶濾芯槍尖;移液器等實(shí)驗(yàn)器具及耗材未及時(shí)消毒滅菌;不同樣本同時(shí)開蓋或樣本劇烈震蕩、反復(fù)吹吸導(dǎo)致氣溶膠形成擴(kuò)散,相互交叉污染。

    ②實(shí)驗(yàn)試劑污染:主要是在PCR組分試劑加[醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)原創(chuàng)]樣過程中,由于移液器、容器、陰性對照及其它試劑被核酸模板或陽性對照污染。加樣過程中,因?yàn)镻CR試劑對溫度十分敏感,需要通過冰浴使得PCR試劑和PCR板/管處于OC,但這個(gè)過程也是充滿了污染的風(fēng)險(xiǎn)的。

    ③擴(kuò)增產(chǎn)物污染:大量拷貝的產(chǎn)物泄[醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)原創(chuàng)]漏或擴(kuò)增后的PCR反應(yīng)管意外開蓋,這是PCR反應(yīng)中最主要最常見的污染問題。因?yàn)镻CR產(chǎn)物拷貝量大,遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于PCR檢測數(shù)個(gè)拷貝的極限,所以極微量的PCR產(chǎn)物污染,就可形成假陽性。

    ④克隆質(zhì)粒污染:作為陽性質(zhì)控品的克隆質(zhì)粒外溢。

    3.【問題】肝功能嚴(yán)重受損時(shí),清蛋白/球蛋白比例應(yīng)該是增高還是降低?

    【解答】隨病情加重而出現(xiàn)A/G比值倒置,此時(shí)提示肝功能嚴(yán)重?fù)p害。A/G的參考值為:1.0~2.0:1。A/G比值倒置就是指的是A(清蛋白)降低,G(球蛋白)升高。所以肝功能嚴(yán)重受損時(shí),清蛋白/球蛋白比例是減低的。

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